مرور کلی

یک سنجش بیان ژن PD-L1 مبتنی بر خون با استفاده از PCR کمی فلورسنت، آزمایش بیومارکر ایمنی را به بیمارانی که قادر به ارائه بافت نیستند، می‌رساند. داستان نظارتی آن در مورد اعتبارسنجی برای فرمت مایع است: روش باید ثابت کند که PD-L1 بافت را به اندازه کافی برای راهنمایی مراقبت ردیابی می‌کند. برای توزیع‌کنندگان، سوال کلیدی تدارکات این است که آیا آزمایشگاه اعتبارسنجی را دارد که نتایج خون را با IHC مطابق در همان بیمار مقایسه کند. یک نتیجه مایع تنها زمانی در مراقبت جایگاه پیدا می‌کند که نشان داده شود در تعداد کافی از موارد با بافت مطابقت دارد تا بتوان به آستانه اعتماد کرد.

نحوه کار

RNA خون کامل استخراج، رونویسی معکوس و با PCR فلورسنت در برابر اهداف ترانسکریپت PD-L1 با یک مرجع داخلی تقویت می‌شود. مقادیر چرخه آستانه به سطح بیان نسبی تبدیل می‌شوند. از آنجایی که هیچ رنگ‌آمیزی درگیر نیست، امتیازدهی مبتنی بر ابزار و قابل تکرار است که ثبات بین سایت‌ها و بین‌المللی را ساده می‌کند. یک کنترل استخراج کیفیت RNA را قبل از تقویت تأیید می‌کند و نمونه‌هایی را که سیگنال پایین گمراه‌کننده‌ای ایجاد می‌کنند، مسدود می‌کند.

موارد بالینی

زمانی که بافت در دسترس نیست یا زمانی که خواندن مجدد PD-L1 بدون بیوپسی دیگر مورد نیاز است، نشان داده می‌شود. تیم‌های انکولوژی از آن به عنوان یک سیگنال مکمل در کنار تصویربرداری و IHC قبلی استفاده می‌کنند. برنامه‌ها همچنین از آن برای ردیابی بیان در طول زمان استفاده می‌کنند، زیرا کشیدن خون برای تکرار بسیار آسان‌تر از بیوپسی مجدد است.

نمونه و زمان تحویل

یک لوله خون EDTA دو تا سه میلی‌لیتری مورد نیاز است؛ همولیز در زمان کشیدن خون اجتناب شود. گزارش یک مقدار بیان نسبی با نام روش PCR را ارائه می‌دهد و به زمینه بیوپسی مایع اشاره می‌کند. زمان تحویل کوتاه است زیرا گردش کار مراحل دستی کمی دارد که برای نتیجه‌ای که یک گفتگوی درمانی کوتاه‌مدت را اطلاع می‌دهد، مناسب است.

ذخیره‌سازی و لجستیک

خون با بسته‌بندی سرد حمل می‌شود؛ پایداری RNA با پردازش سریع محافظت می‌شود. آزمایشگاه‌های خدماتی اجرای PCR معتبر را مستند می‌کنند تا شرکای خارج از کشور به همان معیار کیفیت دست یابند. معرف‌های کنترل شده دسته‌ای و منحنی تقویت ثبت شده، ردیابی را که یک بیوپسی مایع تنظیم شده انتظار دارد، به حسابرسان می‌دهند. برچسب‌های پیک پیش‌پرداخت، زنجیره سرد را از زمان کشیدن تا آزمایشگاه بدون وقفه حفظ می‌کنند که RNA را در مسیرهای طولانی بین‌المللی محافظت می‌کند.

سوالات متداول

س: چرا از PCR خون به جای IHC بافتی استفاده کنیم؟پاسخ: این روش به بیمارانی که بیوپسی ندارند دسترسی پیدا می‌کند و یک امتیاز قابل تکرار مبتنی بر ابزار ارائه می‌دهد. کشیدن‌های مکرر آسان است، بنابراین می‌توان بیان را در طول زمان ردیابی کرد.

س: آیا جایگزین 22C3 IHC می‌شود؟پاسخ: خیر، این مکمل است و در زمینه بیوپسی مایع گزارش می‌شود. مقدار خون باید در کنار تاریخچه بافت خوانده شود، نه به جای آن.

س: چگونه نمونه پایدار نگه داشته می‌شود؟پاسخ: خون EDTA با بسته‌بندی سرد، به سرعت پردازش می‌شود تا RNA محافظت شود. از همولیز در زمان کشیدن خون اجتناب شود، زیرا سلول‌های شکسته می‌توانند خواندن بیان را منحرف کنند.