مرور کلی

Laboratory-developed PD-L1 immunohistochemistry (IHC) assays built on the Cell Signaling Technology (CST) E1L3N rabbit monoclonal antibody are widely used where a regulatory-cleared companion diagnostic is not mandated. سود بالینی هر نتیجه PD-L1 اگر لکه بین ابزارها، دسته ها، یا اپراتورها متفاوت باشد، سقوط می کند. برای توزیع کنندگان و تیم های تهیه آزمایشگاه مرجع،استدلال تجاری برای E1L3N بر بازتولید بین پلتفرم است.، کالیبراسیون با کلون های مرجع و معماری کنترل کیفیت CAP/CLIA که توافق بین آزمایشگاه ها را در محدوده ای نگه می دارد.

کالیبراسیون پلتفرم و هماهنگی میان ابزارها

کلون E1L3N به دامنه C-terminal درون سلولی PD-L1 متصل می شود، به همین دلیل است که پروتکل های مختلف تثبیت و بازیابی را به راحتی نسبت به برخی از آنتی بادی های N-terminal تحمل می کند.اما تک تک کلون ها همثالي رو تضمین نميکنننتیجه محصول آنتی بادی، شیمی تشخیص و ابزار است.بنابراین آزمایشات مبتنی بر E1L3N نیاز به تیتراژ مخصوص به پلتفرم برای ایجاد یک پنجره بهینه رقیق سازی و بازیابی آنتی ژن در هر autostainer دارند.، و آزمایشگاه هایی که E1L3N را روی چندین سیستم عامل اجرا می کنند باید نشان دهند که TPS و آستانه سلول تومور با هم مطابقت دارند.

توافق در محدوده های مربوط به کلینیک مانند TPS 1٪ و 50٪ معیار اصلی است، زیرا انحراف کوچک در نزدیکی یک مرز تصمیم گیری می تواند واجد شرایط بودن بیمار را تغییر دهد.بسیاری از آزمایشگاه ها E1L3N را با آزمایش های مرجع 22C3 و 28-8 در میکروآری های بافت مطابقت یافته مقایسه می کنند.توافق کلی بالاتر از 90 درصد معیار است.

معماری کنترل کیفیت CAP/CLIA

سازگاری پایدار بین سیستم عامل ها یک رویداد اعتباربخشی یکبار نیست؛ این یک نظم مداوم است که توسط CAP و CLIA اجرا می شود.آزمایشگاه باید متغیرهای قبل از تجزیه و تحلیل را قفل کند زمان تثبیت فورمالین، ضخامت اسلاید، و بازیابی آنتی ژن زیرا E1L3N، مانند تمام کلون های PD-L1، حساس به بیش از حد و زیر تثبیت است. کنترل در اسلاید با شناخته شده بالا، پایین،و بیان منفی با هر دسته اجرا می شود تا مشخص شود که لکه نشان دهنده بیان واقعی است نه حرکت.

سیستم کیفیت همچنین مستلزم آزمایش مهارت، تأیید هر دسته جدید آنتی بادی و سیاست های تغییر و آزمایش مجدد تعریف شده است. CLIA صلاحیت پایه را تعیین می کند.CAP شامل بازرسی بررسی همکار و بررسی مهارت می شودبرای خریداران، یک تامین کننده که به طور شفاف ماتریس اعتباربخشی خود را منتشر می کند، یک برنامه کیفیت به اندازه کافی قوی برای دفاع از نتایج PD-L1 را نشان می دهد.

سوالات عمومی

سوال: آیا کلوین E1L3N قابل تعویض با 22C3 یا 28-8 همراه تشخیصی است؟ الف:نه به طور خودکار. E1L3N یک آنتی بادی آزمایشگاهی است که قبل از اینکه نتایج بتواند تصمیمات بالینی را هدایت کند باید با یک مرجع معتبر باشد.با 22C3 و 28-8 مطابقت بالایی داره.

س: چه سطح توافق بین E1L3N در دو سیستم عامل IHC مختلف را انتظار داریم؟ الف:برنامه های قوی با هدف توافق کلی بالاتر از 90٪ در محدوده های مربوط به TPS بالینی 1٪ و 50٪، انحرافات جزئی در محدوده متوسط قابل قبول است اگر از مرزهای تصمیم گیری عبور نکنند.

سوال: چرا CAP/CLIA نیاز به کنترل در هر PD-L1 دارد؟ الف:رنگ آمیزی PD-L1 نسبت به تغییرات تثبیت و بازیابی حساس است. کنترل های روی اسلاید با بیان بالا، پایین و منفی شناخته شده در زمان واقعی حرکت رویه را تشخیص می دهند.بنابراین یک نتیجه تنها زمانی قابل اعتماد است که کنترل های اجرا آن به عنوان انتظار می رود رفتار کنند..

س: آیا اعتباربخشی CAP تضمین می کند که نتایج E1L3N ما با آزمایشگاه مرجع مطابقت داشته باشد؟ الف:اعتباربخشی CAP تضمین می کند که آزمایشگاه از فرآیندهای انضباطی پیروی می کند و از نظر مهارت، که ارتباط قوی با توافق بین آزمایشگاه ها دارد، عبور می کند.این تعداد یکسان را تضمین نمی کند، اما احتمال طبقه بندی هماهنگ را به طور قابل توجهی افزایش می دهد..